Đơn trình bày nguyện vọng cá nhân (Personal Statement)
Trọng tâm nghiên cứu của tôi là: (1) mô tả các khía cạnh chức năng của EspP trong việc gây ra sự tăng sinh tế bào đại thực bào của độc tố Shiga, và (2) xác định các cơ chế mà đại tràng có thể tái tạo sau tổn thương. Từ công trình nghiên cứu sau tiến sĩ của tôi trong phòng thí nghiệm của Tiến sĩ Olga Kovbasnjuk, tôi đã nghiên cứu để xác định các tác động sinh lý bệnh của sự tương tác giữa E. coli enterohemorrhagic (EHEC) với các tế bào ruột của người.
Sử dụng cả mô hình tế bào in vitro và mô hình chuột in vivo, ban đầu tôi xác định đặc điểm của protein EHEC, protease serine của vi khuẩn, EspP, là yếu tố cần thiết trong khả năng gây bệnh của bệnh nhiễm trùng này. Ngoài ra, tôi đã được đào tạo trong phòng thí nghiệm của Tiến sĩ Hugo de Jonge tại Đại học Erasmus (Rotterdam, NL) để thiết lập các mẫu cấy ghép organoid ruột, không ung thư, ex vivo ở người và ruột kết có nguồn gốc từ tế bào gốc trưởng thành.
Gần đây, tôi đã xác nhận chúng như một mô hình chức năng của sinh lý đường ruột bình thường của con người và sinh lý bệnh truyền nhiễm. Dữ liệu sơ bộ thu được từ các nghiên cứu của EHEC và / hoặc sử dụng enteroids đã đóng vai trò quan trọng trong việc nhận được một số khoản tài trợ trong năm qua (bao gồm khoản tài trợ của U18 / UH3, U01, R24 và Gates Foundation; đồng PI: Donowitz, Kovbasnjuk, những người khác), bao gồm cả K01 (PI: In).
Dựa trên chuyên môn nghiên cứu của tôi với các công cụ phân tử và hình ảnh cũng như dữ liệu sơ bộ mới lạ và thú vị của chúng tôi thu được về các organoit đại tràng của con người, tôi có các kỹ năng kỹ thuật độc đáo và kiến thức nền toàn diện để thành công trong các nghiên cứu được đề xuất này. Gần đây tôi đã phát triển một giao thức kỹ thuật để sử dụng chỉnh sửa gen CRISPR / Cas9 để tạo ra các nền văn hóa organoid loại trực tiếp ổn định của con người.
Sử dụng kỹ thuật này, tôi đã bắt đầu thẩm vấn vai trò của các gen liên quan đến tế bào gốc cụ thể trong việc tái tạo ruột kết và khởi phát ung thư đại trực tràng. Dựa trên dữ liệu sơ bộ mới lạ và thú vị của chúng tôi thu được về các organoids của con người đã được chỉnh sửa CRISPR, tôi tin rằng tôi có vị trí duy nhất để hỗ trợ đạt được các mục tiêu được đề xuất trong ứng dụng này.